Se localiza en el Lago Gatún en el centro del Canal de Panamá con un área de 5,364 hectáreas. Lo conforman  las penínsulas de Bohío, Buena Vista, Peña Blanca y Gigante, además de la Isla Barro Colorado de 1,564 hectáreas. El origen de esta isla se remonta a la construcción del Canal de Panamá cuando se represa el Río Chagres y se inunda posteriormente un área para formar el Lago Gatún quedando una colina de 171 metros de altura sobre la superficie del lago y que luego se convertiría en la Isla Barro Colorado. En 1923 a solicitud de un grupo de científicos, se declara esta isla como Reserva Biológica para lo que se construyó allí un laboratorio de investigaciones para ser entonces la primera Reserva de Bosque Húmedo Tropical en el Nuevo Mundo. En 1946 se le otorga al Instituto Smithsonian la responsabilidad de administrar y manejar esta reserva y en 1979 se le agrega las áreas en tierra firme para declararla Monumento Natural.

Isla Barro Colorado es el hogar de 122 especies de mamíferos, incluyendo 72 especies de murciélagos, 5 especies de mono: el mono araña (Ateles fusciceps), el mono cariblanco (Cebus capucinus), el mono titi (Saguinus oedipus geoffroyi), el mono aullador (Alouatta palliata) y el mono nocturno (Aotus lemurinus). También ñeques (Dasyprocta punctata), tapires (Tapirus bairdii), coatíes o gatos solos (Nasua narica), y saínos (Tayassu tajacu).

Su riqueza botánica es igualmente impresionante: más de 1,200 especies de plantas están presentes en la isla y junto con el Parque Nacional de Soberanía brindan refugio a casi el 50% de todas las especies de pájaros y mamíferos documentadas en Panamá.

En la Isla Barro Colorado existen senderos desde 1986 que han sido diseñados para fomentar el respeto por las interacciones ecológica, además de ofrecer la oportunidad de experimentar y participar en la historia natural del bosque. El principal sendero recorre la selva tropical en 45 minutos visitando el Árbol Gigante y los 53 puntos más importantes.

Acceso: Tome la Carretera Gaillard, pasando las esclusas de Miraflores a su izquierda y Albrook y Clayton a su derecha. Continúe por la carretera, pasando las esclusas de Pedro Miguel, la comunidad de Paraíso y el Club de Golf de Summit, y pase por debajo de un pequeño puente de ferrocarril con la inscripción “1929”.

Inmediatamente después del puente, gire a la izquierda por el Camino Gamboa. Pase la entrada del Jardín Botánico de Summit, a su derecha. Después de seguir aproximadamente 11 kilómetros, llegará a un puente de una sola vía que cruza el Río Chagres hacia Gamboa. Después de cruzar el puente, siga recto; pasará una estación de policía. Poco después pasará a su izquierda la División de Dragado y debe continuar recto hasta pasar el antiguo edificio de la aduana a su derecha. Si llega temprano podrá estacionar su vehículo dentro del estacionamiento, sino por favor estacione a orillas de la calle.

Horas de Visita: Martes, Miércoles y Viernes  La lancha sale del muelle de Gamboa hacia Barro Colorado a las 7:15 a.m. Sábados y Domingos: La lancha sale del muelle de Gamboa hacia Barro Colorado a las 8:00 a.m.